原位杂交技术（in situhybridization）是以标记的核酸分子为探针，在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针，在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交，再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。
可以检测cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各种种属的标本，包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。
植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面：
1. 制备组织样品：从植物中取出需要研究的组织样品，如根、茎、叶等。
2. 固定组织样品：将组织样品固定在载玻片上，通常使用或乙醇等化学物质进行固定。
3. 处理组织样品：对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理，以便于DNA探针的穿透和结合。
4. 制备DNA探针：根据需要研究的基因序列，设计并合成DNA探针。DNA探针可以标记荧光染料或性同位素，以便于检测。
5. 杂交DNA探针：将DNA探针与组织样品进行杂交，通常需要在高温下进行，以便于DNA探针与RNA或DNA结合。
6. 检测杂交信号：通过荧光显微镜或计数器等设备，检测DNA探针与RNA或DNA的结合情况，确定目标基因的表达模式和位置。
扫一扫手机网站
在线客服
15002786799
81680037@qq.com