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原位杂交-荧光原位杂交技术-贝科新肽

武汉贝科新肽科技有限公司

  • 主营产品:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
  • 公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
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原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得组织细胞中的特异性核酸得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在核酸的原有位置上显示出来。经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检DNA片段或mRNA进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检核酸的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mRNA在胞质中的表达。











和其它实验方法一样,必须同时设对照试验以证明其实验结果特异性。对照试验的设置须根据核酸探针和靶核苷酸的种类和现有的可能条件去选定。ISHH的优点是它的高度特异性,它可测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。应用高敏感度的性标记cRNA探针在理想的ISHH的实验条件下检测mRNA,其敏感度可达到20个mRNA拷贝/每个细胞。由于双链DNA的稳定性,在用ISHH定位DNA时很少发生丢失,降解,其敏感性高到能够显示在染色体铺片上,有时甚至在组织切片上的单个基因拷贝。正因为如此,对ISHH结果的解释应持慎重态度,特别是前人未报告过的新发现。



原位杂交是一种非常重要的技术,因为它可以在细胞或组织的自然环境中研究基因表达和调控。它可以帮助科学家们了解基因在特定组织或细胞类型中的作用和功能,以及在疾病发生和发展过程中的变化。此外,这项技术还可以用于检测基因变异和染色体异常,以及监测细胞生长和凋亡。

虽然原位杂交是一项非常有用的技术,但它也有一些限制。首先,探针的特异性可能受到干扰,导致错误的结果。其次,探针的数量和位置可能受到细胞或组织中其他成分的影响。此外,这项技术的操作比较繁琐,需要专门的技术和设备,而且需要大量的实验和对照才能获得可靠的结果。